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无菌技术和操作规程是根据科学原则制定的。每个医务人员都应准确熟练地掌握，以有效预防和控制医院内感染的发生，保证患者的安全。 1．无菌操作环境 应清洁、宽敞，操作前半小时须停止清扫工作，减少人群流动、避免尘埃飞扬。 2．无菌操作者要求 操作者要戴好帽子和口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣、戴无菌手套。 3．无菌物品放置 无菌物品必须与非无菌物品分开放置，无菌物品应存放于无菌包或无菌容器中；无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，物品按失效期先后顺序摆放；无菌包的有效期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。 4．无菌操作要求 操作者身体应与无菌区保持一定距离，取用无菌物品时应使用无菌持物钳，手臂应保持在腰部或治疗台面以上，不可跨越无菌区，手不可接触无菌物品，无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内。避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。一切无菌操作，均应使用无菌物品，禁用未经灭菌或疑有污染的物品。 一份无菌物品，只供一位患者使用一次,以防交叉感染。
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护士着装整洁，洗手，戴口罩;环境清洁、宽敞、光线充足;操作台面用擦拭法进行清洁消毒;准备用物治疗盘(大)、无菌持物钳、盛放无菌持物钳的容器、无菌包(无菌治疗巾、换药碗、镊子、弯盘)、无菌棉球罐、无菌纱布罐、无菌生理盐水1瓶、无菌手套、碘伏、棉签、笔、开瓶器、污物碗、手消毒凝胶及洗手液，将所有物品有序摆放。
检查核对，物品的有效期、灭菌标识;打开包布，取出无菌物品;关闭容器盖，放置所需位置。标注开启时间。
自无菌包内取用治疗巾，铺无菌盘;查看无菌包名称和灭菌日期。无菌包放在清洁、干燥、平坦处，解开并将系带卷放于包布下，按原折顺序外层使用手，内层使用持物钳逐层打开无菌包。用无菌持物钳取出治疗巾1块，放在清洁的治疗盘内;放回持物钳，如有剩余治疗巾，将包布按原折痕包起，将系带以“一”字形包扎并注明开包日期、时间;双手捏住治疗巾中间的折边横向拉开双层，由近向远铺于治疗盘上，上面一层向远端呈扇形折叠，开口边向外进行铺盘
自无菌包内取用治疗碗，检查换药碗灭菌日期、失效期、灭菌标识，无潮湿或破损，将换药碗放置在无菌治疗盘内。
自无菌容器内取用棉球、纱布，检查并核对无菌容器名称、灭菌日期、失效期、灭菌标识，取物时，打开容器盖，内面向上置于稳妥处或拿在手中;用无菌持物钳夹取棉球数个，立即盖严容器，将棉球置于治疗碗中;同法夹取无菌纱布数块置于无菌盘中。
取用无菌生理盐水，无菌生理盐水，纱布擦净瓶外灰尘，认真查对药名、剂量、浓度、有效期，检查瓶盖有无松动、瓶子有无裂缝、溶液是否澄清，塑料瓶装或袋装盐水检查外包塑料袋是否有水汽，用开瓶器进行开启瓶口;取碘伏消毒棉签，由瓶塞上缘向下旋转消毒至瓶颈膨大部，无菌塑料瓶装或袋装生理盐水消毒输液口连接处到中部;待干后打开瓶塞;手持密封瓶，标签朝向掌心，倒出少量溶液冲洗瓶口，再由原处倒出溶液至无菌容器换药碗中，倒好溶液立即塞好瓶塞记录开瓶日期、时间病签名，放回原处。
盖无菌盘，拉平治疗巾扇形折叠层盖于物品上，上下边缘对齐，将开口处向上翻折两次，两侧边缘分别向下折一次，露出治疗盘边缘，注明铺盘时间。
戴无菌手套，检查无菌手套的有效日期及包装袋有无破损，打开手套袋，将手套袋平放于清洁、干燥的桌面上打开，一手掀起手套袋开口处外层，另一手捏住手套反折部分内面，取出手套，对准五指戴上，小心戴好。未戴手套的手掀起另一只袋口，再用戴好手套的手指插入另一只手套的反折内面，手套外面，取出手套，同法戴好。双手调整手套位置，将手套的翻边口套在工作衣袖外面，双手对合，交叉检查是否漏气，并调整手套位置
脱手套，用戴着手套的手捏住另一手套腕部外面，翻转脱下漏出大拇指;再将脱下手套的手伸入另一手套内，捏住内面边缘将手套向下翻转脱下。按要求整理用物并处理。洗手，脱口罩。
需注意铺好的无菌盘、开启的无菌物品及消毒液有效期如下，无菌盘有效时间4小时;无菌包24小时;无菌溶液外用有效时间24小时，无菌溶液静脉用有效时间4小时;碘伏有效时间7天;无菌棉签有效时间24小时。
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