细胞生物学期末考试题

安徽大学—学年第一学期 《 细胞生物学 》考试试卷（A 卷） （时间120分钟） 一、填空题（每空格1分，共15分） 1、 膜脂主要包括____________，______________和____________三种类型。 2、 离子通道一般可分为________________、_____________和 ______________3种类型。 3、 COP Ⅰ有被小泡主要负责____________________；COP Ⅱ有被小泡主要负责 ____________________物质运输。 4、 纤毛轴心含有的一束“9＋2”是指_________________________________； 而中心粒的轴心含有的一束“9×3＋0”是指______________________________. 5、 小分子物质的跨膜转运主要有____________和___________两种方式。大 分子物质主要通过__________________完成膜泡转运。 6、 抑制或破坏微丝组装的药物是________________、稳定微丝组装的药物是 _________________。 二、单项选择题（每小题1分，共15分） B B C B A D D D C B A D A C A 1、 参与纤毛运动的蛋白质是______。 A. 驱动蛋白 B. 动力蛋白 C . tau蛋白 D. 微管结合蛋白 2、 用胸腺嘧啶核苷酸处理增殖中的细胞可使其阻滞在________期。 3、 不属于蛋白酪氨酸激酶类型的受体是________。 A ． EGF 受体 B ． PDGF 受体 C ．TGFβ受体 D ．IGF-1受体 4、 异染色质是指________。 A ．高度凝集和转录活跃的；B ．高度凝集和转录不活跃的 C ．松散和转录活跃的； D ．松散和转录不活跃的 5、 核小体包含有__________。 A ．H2A, H2B,H3, H4各两个分子 B ．H2A,H2B 各4 个分子； C ．H3,H4各4个分子；D ．H2A, H2B,H3,H4各1 个分子，以及4 个非组蛋白分子 6、 线粒体的主要功能是_________。 A ．由丙酮酸形成乙酰辅酶A B．进行三羧酸循环 C ．进行电子传递、耦联磷酸化 D．以上都是 7、下列不是有丝分裂前中期的主要事件________。 A 、 膜破裂 B、纺锤体开始装配 C 、染色体呈明显X 形 D 、染色单体向两极运动 8、信号蛋白的信号肽的切除发生在_________。 A 、高尔基体 B 、过氧化物酶体 C 、线粒体膜 D 、内质网膜 9、亲核蛋白进入细胞核的方式是_______。 A 、被动扩散 B、基因转移 C 、主动运输 D、胞吞-胞吐作用 10、Na +—H + 交换载体在使Na +入胞的同时将H +排出细胞，此转运方式为_________： A 、主动运输 B、反向协同运输 C、同向协同运输 D、被动运输 11、以下________蛋白能沿着微管向正极（＋）运动？ A 、驱动蛋白 B、胞质动力蛋白 C、封端蛋白 D、摩托蛋白 12、下列哪种物质在被动扩散中不能透过人工脂双层膜_________。 A ．水 B. 甘油 C. 脲 D. 氯化铵 13、膜脂分子不具备的运动方式是___________： A、向各方向运动 B、侧向扩散 C 、翻转运动 D、旋转运动 14、植物细胞、真菌（包括酵母）和细菌细胞质膜的主要运输蛋白是______： A 、Na+-K+-ATP酶 B、Ca2+ －ATP 酶 C 、 H+－ATP 酶 D 、载体蛋白 15、Na +—K +泵水解一分子ATP 可转运_________ A 、3 个Na +、2个K + B、3 个K +、2个Na + C、2 个Na +、2个K + D、3 个Na +、3个K + 三、名词解释题（每小题3分，共30分） 1. 单克隆抗体技术-把小鼠骨髓瘤细胞与经绵羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞（能产生B 淋巴细胞）在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生融合。融合的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，一方面可分泌抗绵羊红细胞的抗体，另一方面像肿瘤细胞一样，可在体外培养条件下或移植到体内无限增殖，从而分泌大量单克隆抗体。 2. 原癌基因---也称细胞癌基因，指正常细胞中与病毒癌基因高度同源，且末激活的与控制细胞生长与分裂相关基因。 3. 细胞骨架－是由蛋白纤维交织而成的立体网架结构，它充满整个细胞质的空间，与外侧的细胞膜和内侧的核膜存在一定的结构联系，以保持细胞特有的形状，并与细胞运动有关。(也可以这样回答： 从广义上讲，细胞骨架包括细胞质骨架、细胞核骨架、细胞膜骨架和细胞外基质。从狭义上讲，细胞骨架即为细胞质骨架，包括微管、纤丝两大类纤维成分) 。 4. 分泌型胞吐途径－真核细胞都从高尔基体反面管网区分泌的囊泡向质膜流动并与之融合的稳定过程。 5. 化学渗透学说___呼吸链的各组分在线粒体内膜中的分布是不对称的，当高能电子在膜中沿呼吸链传递时，所释放的能量将H ＋从内膜基质侧泵至膜间隙，由于膜对H ＋是不通透的，从而使膜间隙的H ＋浓度高于基质，因而在内膜的两侧形成电化学质子梯度，也称质子动力势。在这个梯度驱动下，H ＋安穿过内膜上的ATP 合成酶流回到基质，其能量促使ADP 和Pi 合成ATP 。 6. 灯刷染色体____是卵母细胞进行减数第一次分裂时停留在双线期的染色体，它是一个二价体，包含4条染色单体，此时同源染色体尚未完全解除联会，因此可见到几处交叉。这一状态在卵母细胞中可维持数月或数年之久。 7. 亲核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列，这些内含的特殊短肽保证了整个蛋白质能够通过核孔复合体被转运到细胞核内。这段具有“定向”、“定位”作用的序列被称为核定位序列或核定位信号（NLS ）。 8. 次级溶酶体____是初级溶酶体与细胞内的自噬泡或异噬泡、胞饮泡或吞噬泡融合形成的复合体，分别称为自噬溶酶体和异噬溶酶体，二者都是进行消化作用的溶酶体。 9. 协同运输____在载体蛋白介导的物质运输中，一种许多主动运输不是直接由ATP 提供能量，而是由储存于膜上的离子梯度中的能量来驱动的，这一能量来源与进行耦联运转的蛋白相联系来完成物质跨膜运输，即一种物质的运输依赖于第二种物质同时运输。 10. 受体_____ 是一种能够识别和选择性结合某种配体（信号分子）的糖蛋白，当与配体结合后，通过信号转导作用将胞外信号转换为胞内化学或物理的信号，以启动一系列过程，最终表现为生物学效应。 四、问答题（每小题10分，共40分） 1. 流动镶嵌模型认为膜中的脂类和蛋白质是流动的，有哪些实验可证明？ 答一： 1、荧光抗体免疫标记实验：用抗鼠细胞膜蛋白的荧光抗体（显绿色荧光）和抗人细胞膜蛋白的荧光抗体（显红色荧光）分别标记小鼠和人的细胞表面，然后用灭活的仙台病毒处理使两种细胞融合，10min 后不同颜色的荧光在融合细胞表 面开始扩散，40min 后已分不清融合细胞表面绿色荧光或红色荧光区域。 2、成帽和成斑现象 在某些细胞中，当荧光抗体标记时间继续延长，已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布，聚集在细胞表面的某些部位，即所谓成斑现象，或聚集在细胞的一端，即成帽现象。 3、光脱色恢复技术：在某些细胞中，当荧光抗体标记时间继续延长，已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新分布，聚集在细胞表面的某些部位，即所谓成斑现象。聚集在细胞的一端，即成帽现象。成斑和成帽现象进一步显示了膜蛋白的流动性。 2. 试述核孔复合体在主动运输中的选择性主要表现在哪三个方面？ 答二： 1、对运输颗粒大小的限制。主动运输的功能直径比被动运输大，约10－20nm ，甚至可达26nm 。像核糖体亚单位那样大的RNP 颗粒也可以通过核孔复合体从核内运输到细胞质中，表明核孔复合体的有效直径的大小是可被调节的。2、通过核孔复合体的主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需要消耗ATP 能量，并表现出饱和动力学特征。3、通过核孔复合体的主动运输具有双向性，即核输入与核输出，它既把复制、转录、染色体构建和核糖体亚单位装配等所需要的各种因子如DNA 聚合酶、RNA 聚合酶、组蛋白、核糖体蛋白等运输到核内；同时又能将翻译所需的RNA 、装配好的核糖体亚单位从核内运送到细胞质。有些蛋白质或RNA 分子甚至两次或多次穿越核孔复合体，如核糖体蛋白、snRNA 等。 3. 请叙述低密度脂蛋白(LDL)的受体介导的胞吞作用。 答三： 受体介导的胞吞作用是大多数动物细胞通过网格蛋白有被小泡从胞外液摄取特定大分子的有效途径。被转运的大分子物质(配体) 先与细胞表面的受体结合，形成受体-大分子复合物并扳动内化作用。选 在该处质膜部位在网格蛋白参与下形成有被小窝，然后是深陷的小窝脱离质膜形成有被小泡。有被小泡经脱被作用并与胞内体融合。通过胞内体的酸解(PH5-6) 作用，从而引起LDL 与受体分离。胞内体以出芽的方式形成运载受体的小囊泡，返回细胞质膜，受体重复使用。然后含有LDL 的胞内体与溶酶体融合，LDL 被水解，释放出胆固醇和脂肪酸供细胞利用。 一、填空题 磷脂，糖脂，胆固醇 电压门通道，配体门通道，压力激活通道 负责回收、转运内质网逃逸蛋白返回内质网；负责从内质网到高尔基体 中央有2个完全微管，外周有9组各有A 、B 亚基组成的二联体微管；圆筒的壁由9组3联微管构成，中心没有完全微管 被动运输、主动运输、胞吞胞吐作用 细胞松驰素；鬼笔环肽

看看对不对哈体外培养（in vitro culture）包括：组织培养（tissue culture）、细胞培养（cell culture）、器官培养（organ culture）。顾名思义，就是将活体结构成分（如活体组织、活体细胞或者活体器官等）从体内或其寄生体内取出，放在类似于体内生存环境的体外环境中，让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。体外培养已经历了约一百年的发展历史，但发展初期进程比较缓慢，没有引起很多学者的重视。直到上世纪50年代后期，体外培养技术才广泛应用于生物学研究的各个领域，使这项技术得到飞速发展。现在体外培养已成为细胞工程、基因工程、抗体工程的重要组成部分。细胞培养指从生物机体取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞，也可把体外培养细胞分散成单个细胞在体外条件下培养，细胞能继续存活与增殖。培养过程中细胞不再形成组织。发展与完善细胞培养技术围绕防止污染、改进培养方法、设计新型培养容器、设计不同的培养液等几个方面进行。1885年Roux温生理盐水培育鸡胚组织；1903年Jolly，1906年Beebe等发明了盖片悬滴培养；1907年Harrison培养蛙胚神经成功，开始创建盖片凹玻璃悬滴培养法； 1910、1912年Carrel采用无菌操作、更新培养基、传代，完善了悬滴培养法； 1924年Maximow采用双盖片悬滴培养法；1923年Carral设计创立了卡氏瓶培养法，用此法可根据需要随时更换培养液，既有利于组织不断生长，又可以运用不同种类的营养液培养不同的细胞，极大地推动了当时组织培养研究。Earle等加以改进，使大量细胞能直接生长于玻璃瓶壁上，培养了正常细胞与肿瘤细胞的细胞株。至此大多数研究人员都采用培养瓶培养细胞。组织培养从二十世纪40年代起迅速发展,在培养容器、培养基和培养技术等方面出现了很多革新。在培养容器方面, 由简单的用试管、旋转管培养，发展到多种培养瓶培养，近年来，塑料瓶、皿、多孔培养板的使用已日趋普遍。在培养基方面，从50年代初，Parke、Eagle等设计出合成培养基后，从纯天然培养基到合成培养基、从鸡胚浸出液发展到动物血清（促细胞生长物），直至60年代设计出无血清培养基。首先反映在设计不同种类的缓冲盐溶液，以用来培养不同的细胞和洗涤细胞。Earle在1948年设计了含有碳酸氢钠等盐类的Earle氏盐溶液，Hank’s在1949年设计了Hank’s氏盐溶液。在培养技术方法方面，革新进展更为迅猛，Earle、Dulbecco等于1943年创建单层细胞培养法，首建长期传代的L-细胞系。 1948年Sanford创建单细胞分离培养法，获L-细胞纯系。 1951年Gey首建人肿瘤细胞——Hela细胞系。 1961年Hayflick首建人二倍体细胞系25种，开辟了应用新方向。从50年代末开始，组织培养技术应用进入了一个繁盛的阶段，广泛应用于生物学和医学研究各个领域。 诱变建立遗传缺陷细胞株、杂交瘤技术制备单抗、发展细胞大量培养技术、利用重组技术构建工程细胞株，已成为生物工程的重要生产手段。 在连续灌注培养工艺方面，美国Ohashi,Ryo等人2001年报道采用2L一次性生物反应器灌注培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体，以Becton Dickenson Cell Mab+10%胎牛血清+1％聚醚F-68为培养基，最高活细胞密度超过1×107cells/ml；2001年瑞士Heine, Holger等人用带超声细胞分离器(UCS)的连续灌注搅拌罐生物反应器培养鼠杂交瘤细胞生产单克隆抗体，稳态培养时活细胞密度超过2×107cells/ml；2004年德国Thomas等人在1L搅拌罐生物反应器中培养rCHO细胞生产人MUC-1糖蛋白，采取葡萄糖浓度限制的高产率灌注工艺减少有害代谢物，代谢转向TCA循环增加，活细胞密度保持在(1～2)×107cells/ml。在流加悬浮培养工艺方面，美国麻省理工Xie Liangzhi等人2000年报道在2L生物反应器中流加培养杂交瘤细胞，通过营养控制降低氨和乳酸的比生成速率，补充培养基包括营养成分、胎牛血清和痕量金属，最大活细胞密度达到×107cells/mL。细胞分离就是通过物理、生物、化学的方法，将生物组织分离为单细胞分散系的过程。一般动物组织经培养，其细胞会延培养基表面平铺生长，自行达到细胞分离的目的。还可用胶原酶处理分离。而植物组织培养后会形成愈伤组织，要用化学方法才能获得单个细胞（一般用纤维素酶）。